期刊简介
本刊为解剖专业学术性刊物。发表解剖学、应用解剖学、神经解剖学、组织学、胚胎学、比较解剖学、细胞学等方面的论著，刊登研究简报、国内外形态学最新进展、教学经验交流、变异畸形病例等。读者对象为相关专业教学、科研人员及临床医师。
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首页>解剖学杂志
- 杂志名称：解剖学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中国解剖学会
- 国际刊号：1001-1633
- 国内刊号：31-1285/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中)
重组腺病毒Ad5-hBDNF-EGFP的构建及体外转染大鼠间充质干细胞后基因表达
王长昇；林建华；吴朝阳；张立群
关键词：腺病毒载体, 人脑源性神经营养因子, 增强型绿色荧光蛋白, 骨髓间充质干细胞, 基因修饰
摘要：目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因为标志基因、人脑源性神经营养因子(hBDNF)基因为目的基因的重组腺病毒Ad5-hBDNF-EGFP,体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs),探讨转染效率及转染基因的表达情况.方法:构建穿梭质粒pDC316- hBDNF-mCMV- EGFP；利用AdMax包装系统,穿梭质粒与骨架质粒共转染293细胞,同源重组产生复制缺陷型重组腺病毒Ad5-hBDNF- EGFP,经反复感染293细胞扩增病毒.SD大鼠骨髓,体外分离、培养rMSCs,流式细胞仪检测rMSCs表面标记物；不同感染复数( MOI)的重组腺病毒转染第3代rMSCs,检测转染率及hBDNF蛋白的表达变化.结果:PCR、酶切鉴定及测序证实穿梭质粒和重组腺病毒载体成功构建.rMSCs流式细胞仪检测CD34、CD45阴性表达,CD9、CD90阳性表达.腺病毒体外转染rMSCs后荧光显微镜下可见绿色荧光信号表达,免疫印迹法检测出hBDNF蛋白的表达；绿色荧光表达强度、转染率及hBDNF蛋白的表达水平均随着腺病毒MOI的增加而增加,佳MOI为100.结论:体外成功构建Ad5-hBD-NF-EGFP,并能有效转染rMSCs,成功获取基因工程干细胞,hBDNF及EGFP基因均可在该细胞中得到有效表达.
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